温度环氧乙烷的杀菌作用、灭菌时间、对物品的穿透能力与温度密切相关。在一定的范围内，随着温度的升高，能增强其穿透力和缩短灭菌作用的时间，环氧乙烷的杀菌作用加强。温度的常规极限通常在44℃一56℃，一般常用的合适温度为50士3℃。但是当温度高到足以使药物发挥作用时，再升高温度，则杀菌作用亦不再加强。在较高的温度下(例如50℃一57℃)环氧乙烷的用量为60mg/L、800mgL/和1500mg/L，其灭菌作用差异不明显。使用环氧乙烷灭菌时，通过适当的提高温度，可以节省孝感环氧乙烷灭菌用量与缩短灭菌时间。影响温度的因素有:产品总装载量(<80%)、堆放、包装材料及厚度、被灭菌物品的温度等。同时必须关注温度的均匀性，其对灭菌效果也非常重要。

环氧乙烷浓度灭菌的效果取决于环氧乙烷的分子碰撞和受灭菌的生物体。因此，在一定范围内，分子越多工艺越有效。用600mg/L环氧乙烷的灭菌工艺比用300mg/L的工艺大约快一倍，用1200mg/L的工艺比用600mg/L工艺又快一倍。但是工业上通常不采用低于30mg/L和高于1200mg/L的环氧乙烷气体浓度。

环氧乙烷气体浓度低于300mg/L，在实际的工艺时间内基本不会产生确实有效的、足够的环氧乙烷分子。而浓度高于1200mg/L，不但不能缩短工艺的时间，反而增加工艺所需的气体量。所以，综合考虑到环氧乙烷的费用及残留量等因素，工艺常设计成较低的环氧乙烷浓度。400一600mg/L是当今常用的条件。环氧乙烷的浓度可以用间接法或直接法来检测。间接法可用称重法和压力测量法计算其浓度;直接法可直接采样用气相色谱及远红外分析的方法测得其浓度。

相对湿度被灭菌物品的含水量、微生物本身的干燥程度和灭菌环境的相对湿度，对环氧乙烷的灭菌作用均有显著的影响。通常有以下4种情况:

当微生物含水量过高、灭菌环境湿度低时，水分的渗透方向是向外的，环氧乙烷不易进入微生物体内，则灭菌效果不好;

当微生物含水量低于外环境湿度，而且微生物本身不是十分干燥时，水分向微生物体内渗透，环氧乙烷容易进入，灭菌效果较好;

当微生物含水量太高、外环境湿度也大时，两者处于高湿度动态平衡，由于水分太多，环氧乙烷被稀释或水解，灭菌效果差，需要提高环氧乙烷浓度或延长作用时间才能达到灭菌;

若微生物太干燥、外环境湿度也低，两者处于低湿度动态平衡，环氧乙烷不易穿透微生物内部，缺乏烷入。